超聲法在革蘭氏菌破壁的應(yīng)用
革蘭氏菌細(xì)胞壁較厚，而且有大量特殊組份磷壁酸，破壁難度很大；革蘭氏菌核酸分析、蛋白分析在生物醫(yī)藥領(lǐng)域又有著重要意義，所以破壁的方法選擇就尤為重要，在能保證破壁的高產(chǎn)率基礎(chǔ)上，又能實(shí)現(xiàn)所需胞內(nèi)物質(zhì)的高回收率，才是*佳選擇。超聲法由于自身優(yōu)勢在革蘭氏菌破壁中得到廣泛應(yīng)用。
可以用于革蘭氏菌破壁的方法主要有：
1.研磨法，可用的研磨劑有氧化鋁、玻璃珠、玻璃粉等?？梢允謩?dòng)在研缽里磨，也可以研磨機(jī)。原理是：在**懸液中加入研磨劑，研磨時(shí)研磨劑顆粒碰撞而破碎細(xì)胞。
2.超聲法，使用超聲波細(xì)胞破碎儀，原理是：利用超聲波對細(xì)胞內(nèi)所產(chǎn)生的空穴作用破菌，同時(shí)超聲過程產(chǎn)生的漩渦對菌體也有剪切力，有助于破菌。
3.壓力法，原理是：細(xì)胞懸液以極快的速度撞擊靜止面，使菌體破碎。工業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用較多。
4.滲透法，將懸液與高滲透壓液體中平衡，再轉(zhuǎn)移至低滲透壓液體中，此時(shí)大量水分滲入細(xì)胞，使細(xì)胞破裂。只適合于胞壁較弱的革蘭氏陰性菌。可以和其他方法聯(lián)合使用。
5.凍融法, 原理是：細(xì)胞內(nèi)胞液凍結(jié)時(shí)產(chǎn)生冰晶，體積增大，撐破菌體。
6.酶解法，分為菌體自溶和溶菌酶兩種方法。
超聲法優(yōu)勢：相比于其他處理方法，超聲法可以更快的完成工作，且相對方便控溫。超聲法可實(shí)現(xiàn)極高的破碎率，節(jié)約樣品，減少重復(fù)次數(shù)。也能有效保留胞內(nèi)物質(zhì)的完整性，方便進(jìn)行下一步研究。
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